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Os mutantes selecionados serão utilizados para expressão na microalga textit{C. reinhardtii}. Recentemente, construíram um transgene nuclear (pBle2A-SP-Xyn1) em C. reinhardtii para a produção e secreção de proteínas recombinantes. A metodologia desenvolvida permite que as proteínas recombinantes produzidas pelas microalgas sejam secretadas para o meio de cultivo, o que facilita a extração e a purificação das proteínas produzidas. Dessa forma, a sequência do gene da xilanase no transgene pBle2A-SP-Xyn1 será substituída pelos genes mutantes das beta-glicosidases selecionadas. As construções genéticas serão sintetizadas pela GeneArt (Life Technologies) através do anelamento de oligonucleotídeos. |